Hallazgo de Protozoarios en Pacientes Infectados con el Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH)

Antecedentes y objetivos: El síndrome de inmunodeficiencia humana (sida) es causado por los retrovirus de inmunodeficiencia humana (VIH) 1 y 2. Estos virus depletan en forma selectiva y progresiva los linfocitos TCD4+ ayudadores; cuando el nivel de estos alcanza un punto crítico (200 células/mm3) el paciente se vuelve susceptible a sufrir infecciones por agentes oportunistas. Dentro de los agentes oportunistas que pueden causar diarrea en estos pacientes se encuentran Cryptosporidium parvum, Giardia intestinalis y Entamoeba histolytica. El objetivo del presente trabajo fue determinar la presencia de parásitos en una población VIH seropositiva y un grupo control VIH seronegativo.

Métodos: Entre agosto de 1996 y febrero de 1997 se analizaron 1541 muestras de heces de pacientes que acudieron al laboratorio clínico del Hospital San Juan de Dios, de estas 1416 muestras fueron de pacientes VIH seronegativos y 125 de pacientes VIH positivos. Las muestras de heces se procesaron por tres métodos: con solución salina al 0,85%, con solución de Lugol y con solución de Kato. Se compararon los métodos de concentración por flotación con NaCl (25%) y con Sacarosa (33%). Se realizaron 2 frotis, se dejaron secar, se fijaron con metanol y se tiñeron por dos métodos: (1) Koster y (2) Ziehl-Neelsen modificado. A los pacientes VIH positivos se les realizó un conteo de linfocitos T CD4+ y CD8+ en sangre periférica por citometría de flujo, utilizando un citómetro de Facs Scan de Becton Dickinson.

Resultados: De las 1416 muestras de pacientes seronegativos analizadas, en 4,38% se encontró alguno de los 3 parásitos estudiados; 2,8% de las muestras fueron positivas para E. histolytica y 1,6% para G. intestinalis. En ninguna de las muestras analizadas de pacientes VIH negativos se encontró C. parvum. De las 125 muestras de pacientes VIH positivos, 31,2% fueron positivas por parásitos. Entamoeba histolytica se encontró en un 4,8% de las muestras, el promedio de linfocitos T CD4+ en estos pacientes fue de 347 linfocitos/mm³. Giardia intestinalis se encontró en un 8,0% de las muestras de pacientes VIH+, en este grupo el promedio de linfocitos TCD4++ fue de 185 linfocitos/mm³ Cryptosporidium parvum se encontró en un 4,8% de los casos seropositivos, y en estos pacientes el promedio linfocitos TCD4+ fue de tan solo 13 linfocitos/mm³. Un 13,2% de las muestras tenían protozoarios no patógenos. La correlación entre la presencia de C. parvum y un conteo de menos de 200 linfocitos TCD4+/mm³ fue significativa (p<0,005) en la prueba estadística de Chi Cuadrado (x²).

Conclusión: La población estudiada de pacientes VIH positivos presentó una mayor incidencia de parásitos en los exámenes de heces que el grupo control. La presencia de C. parvum se observó únicamente cuando existía inmunosupresión profunda. Este parásito se encontró solo en pacientes con sida con conteos de linfocitos CD4+ inferiores a 50 células/mm³. La mejor observación microscópica de C. parvum se obtuvo con el empleo de una combinación del método de Shearer para concentrar y el método Ziehl-Neelsen modificado para teñir.

Background and aims: The acquiered immunodeficiency syndrome (AIDS) is caused by human retroviruses (VIH) 1 and 2. These virus selectively and progressively deplete CD4+ helper T lymphocites; when the level of these cells reaches a critical point (200 cells/mm3), the patients become susceptible to infections by opportunistic agents. Among the opportunistic agents that can cause diarrhea are Cryptosporidium parvum, Giardia intestinalis, and Entamoeba histolytica. The aim of the present work was to determine the presence of parasites in the stool of an VIH seropositive population and an VIH seronegative population

Methods: A total of 1541 stool samples were analyzed between August 1996 and February 1997 from patients attending the Clinical Laboratory of the San Juan de Dios Hospital in Costa Rica. From these samples, 1416 were from VIH seronegative patients and 125 from VIH seropositive patients. The stool samples were processed by three methods: direct, with Lugol solution, and with Kato solution. Two methods of stool concentration were used, by flotation with NaCl (25%) and with sacarose (33%). Two smears were preformed, which were aloud to dry at air, fixed with methanol, and stained by the methods of Koster and modified Ziehl-Neelsen. To all VIH positive patients a lymphocyte counting, CD4+ and CD8+ T cells were analyzed by flow cytometry on blood samples using a Facs Scan from Becton Dickinson and the results were correlated with the parasites found in the stool.

Results: Of the 1416 samples studied from VIH seronegative patients, in 4,38% one of the three parasites under study was found 2.8% of the samples were positive for E. histolytica and 1,6% for G. intestinalis. In any of the samples studied from VIH negative patients C. parvum was found. Of the 125 samples from VIH positive patients, 31,2% were positive for parasites. E. histolytica was found in 4.8% of the samples, the mean CD4+ T cell count was 347 lymphocytes/mm³. Giardia intestinalis was found in 8.0% of the samples from VIH+ patients, in this group, the mean CD4+ T cell count was 185 cells/mm³. C. parvum was found in 4.8% of the seropositive patients, and their mean CD4+ T cell count was 13 cells/mm³ In 13.2% of the samples, the parasites found were non-pathogenic protozoa. The correlations between the presence of C. parvun and a CD4+ T cell count under 200 cells/mm³ were significant (p<0.005) by Chi square (2)

Conclusions: The VIH positive population studied had a higher incidence of parasites in the stool samples than the control VIH negative group. The presence of C. parvum was observed only when there was evidence of a profound immunosuppression caracteristic of AIDS. This parasite was found only in patients with CD4+ T cells counts below 50 cells/mm³. The best microscopic detection of C. parvum was achieve with the concentration method of Shearer and the modified Ziehl-Neelsen stain.